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目前有哪些比較熱門的腫瘤單細胞制備技術?
基于酶解的試劑盒法
腫瘤組織快速解離試劑盒2:采用三階酶控解離技術,由膠原酶 VI、中性蛋白酶及熱滅活胎牛血清組成定向酶解系統。能空間選擇性裂解腫瘤間質中的膠原纖維,含鈣離子穩定劑保護膜結構,還有 RNase 抑制劑保護 RNA。配套漸進式篩網系統和離心渦旋技術,可將細胞活性維持在 93% 以上,且解離耗時短,僅 35 分鐘,顯著優于傳統機械研磨法。
Miltenyi Tumor Dissociation Kit:專為從人類腫瘤組織溫和快速地生成單細胞懸液而開發,針對高產量的腫瘤細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞進行了優化,同時保留重要的細胞表面表位,非常適合與 gentlemacs™解離器結合,實現省時且可重復的單細胞懸液制備。
單細胞多組學測序技術 Parallel - seq1:由清華大學生命科學學院張強鋒副教授課題組開發,結合了組合條形碼標記與微液滴測序技術,實現 “微液滴過載" 策略。可高通量、低成本地在同一個單細胞中同步測量基因表達(scRNA - seq)和染色質可及性(scATAC - seq)。一次實驗可并行分析數十萬乃至百萬級細胞,支持多樣本的多組學聯合分析,降低批次效應影響,單個細胞成本僅為現有技術的約 1/30。
機械解離與酶解結合法:通過機械離解和酶解離的組合,例如使用剪刀、鑷子等器械先將腫瘤組織剪碎,再利用組織研磨器等進一步破碎,然后結合膠原酶 / 透明質酸酶混合物等進行酶解,最終獲得較高存活率的單細胞懸浮液。這種方法可以充分發揮機械解離和酶解的優勢,在保證細胞活性的同時,提高解離效率。
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